細胞週期異常會導致細胞癌化等現象,而組蛋白脫乙醯基酶 (histone deacetylase, HDAC)可去除蛋白質的乙醯基,同時,HDAC 基因可調節細胞週期,但詳細機制尚未明瞭。本研究探討 HDAC 家族 HDA1 及 RPD3 基因調節細胞週期的機制,以同源重組技術製作釀酒酵母的 HDAC 基因剔除菌株,進行 spotting assay 細胞培養瞭解細胞生長狀況;流式細胞技術分析細胞週期染色體套數的變化;西方墨點法觀察細胞週期檢查點相關蛋白磷酸化的狀態。並根據實驗結果,提出 HDAC 基因調控細胞週期之機制的假說。
本研究從以下三點探討 HDAC 基因調控酵母菌細胞週期之作用機制:
1. 探討 HDAC 基因對酵母菌細胞週期之影響。
2. 探討 HDAC 基因如何影響 DNA 損傷時酵母菌的反應
3. 探討 HDAC 基因調節細胞週期協助酵母菌面臨 DNA 損傷之分子機制。
1. HDAC 基因剔除菌株,細胞週期進行速度變慢。
2. 在 DNA 複製壓力環境下,含有 RPD3 基因剔除的菌株,其 Rad53 被快速降解,導致 S 期檢查點異常,無法修復損傷的 DNA。
3. HDAC 基因可維持 S 檢查點正常作用,讓細胞修復損傷的 DNA。